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應用凝集素芯片檢測肝癌細胞膜表面糖鏈變化

編輯:南京科瑞芯生物科技有限公司時間:2019-05-13

        利用凝集素糖鏈特異親和原理構建對細胞膜表面糖鏈進行即時檢測的凝集素芯片體系,檢測肝癌發生過程中細胞膜糖鏈的變化.從H22細胞系、正常小鼠和肝癌模型鼠肝組織中提取細胞進行熒光標記,激光掃描儀檢測凝集素位點捕獲的細胞,根據凝集素特異親和性確定細胞膜表面糖表達譜,顯微鏡下觀察捕獲細胞的形態.對凝集素芯片捕獲細胞的最佳條件進行探討,用甘露糖抑制試驗、流式細胞儀和不同血型紅細胞驗證了凝集素捕獲細胞的特異性.結果顯示:正常和肝癌小鼠肝細胞膜表面糖鏈存在較大差異,正常組只有PSA、DSL、STL、NPL凝集素位點捕獲到細胞,實驗組只有LTL和DBA位點沒有捕獲到細胞,提示小鼠肝癌組織細胞膜表面糖鏈顯著增加,細胞膜上唾液酸、乙酰葡萄糖、乙酰半乳糖、甘露糖和半乳糖糖鏈表達增加,這些糖鏈及其相關糖蛋白可能在肝癌的發生和發展中起一定作用.該凝集素芯片有較好的穩定性和特異性,可以對細胞膜表面糖鏈進行動態、即時、通量的檢測,為研究細胞膜表面聚糖在細胞發育和癌變等過程中的變化提供了一個技術平臺.

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